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Lívia Cordi; Márcia Regina Assalin; Edna dos Santos Almeida;
Sandra Gomes de Moraes; Nelson Durán
RESUMO
O processo de lodos ativados é amplamente utilizado no tratamento de efluentes domésticos e industriais, podendo ser empregado no tratamento dos efluentes papeleiro, têxtil (ambos caracterizados por elevada DQO, toxicidade e cor intensa) e das indústrias queijeiras (caracterizado pela altíssima carga orgânica). Para um melhor desempenho do sistema biológico na remediação de efluentes é necessário que a biomassa esteja adaptada ao efluente a ser tratado. Neste trabalho foi avaliado o impacto do processo de aclimatação do lodo ativado coletado de uma estação de tratamento de esgoto doméstico aos efluentes papeleiro, têxtil e queijeiro. As diferenças observadas nos lodos aclimatados aos diferentes efluentes indicam que a população presente no sistema de lodos ativados é dependente dos substratos estudados, resultando na predominância de diferentes classes de protozoários. Quanto às bactérias presentes nenhuma diferença foi observada para os parâmetros estudados.
Palavras-chave: lodo ativado; microbiota; efluentes.
IMPACT ON ACTIVATED SLUDGE MICROBIOTA DURING ACCLIMATION WITH DIFFERENT INDUSTRIAL EFFLUENTS
ABSTRACT
The activated sludge process is widely used in domestic and industrial effluents being also applied in pulp and paper textile (both characterized by a high COD, toxicity and intense color) and dairy (cheese) (characterized by extremely high organic charge) industries. In order to get the high efficient performance the biological system, in the remediation the biomass, this it must be been adapted to the treated effluent. In this case was evaluated the impact of the process of acclimation to the activated sludge collected in a domestic treatment station to a pulp and paper, textile and dairy effluents. The differences found in the acclimated activated sludge indicated that the biota in this one was dependent from the substrate studied, resulting the predominance of the different classes of protozoa. Meanwhile, the bacterial distribution in the activated sludge no differences for the studied parameters were observed.
Keywords: activated sludge; microbiota; effluents.
INTRODUÇÃO
O processo de lodo ativado foi desenvolvido na Inglaterra em 1914. Desde então, o processo é amplamente utilizado no tratamento de águas residuárias industriais e domésticas. Este pode ser definido como um sistema no qual uma massa biológica cresce e flocula, sendo continuamente circulada e colocada em contato com a matéria orgânica do despejo líquido afluente ao sistema, na presença de oxigênio (CORDI et al., 2007). Tal sistema é constituído de tanque de aeração (reator) e uma unidade de separação dos sólidos, de onde o lodo separado é quase que totalmente retornado ao tanque de aeração para mistura com as águas residuais, e o restante é descartado (SOBRINHO, 1983).
O sistema de lodos ativados possui uma população de microrganismos característica que é composta por bactérias, fungos, algas e protozoários. Dentre a população biológica presente no sistema de lodo ativado, as bactérias constituem o grupo mais importante e as mais freqüentes são: Pseudomonas, Zooglora, Schromobacter, Flavobacterium, Nocardia, Bdellovibrio, Mycobacterium, Klebscella e bactérias nitrificantes como Nitrossomas e Nitrobacter (CORDI et al., 2007). Formas filamentosas podem estar também presentes. Também são encontrados protozoários (segundo grupo mais numeroso após as bactérias) ciliados, flagelados e amebas, além de micrometazoários (anelídeos, rotíferos, nematóides e tardígrados). Estes atuam como polidores do efluente, consumindo bactérias dispersas que não floculam e flocos biológicos de partículas que não sedimentam, sendo sua presença um indicativo das condições de depuração do sistema (CETESB, 2000; GAUTHIER, 2000).
A presença da microbiota é um importante indício de funcionamento do processo, sendo um bom indicador biológico (CORDI et al., 2008). A observação quantitativa e qualitativa da microbiota vem sendo utilizada há anos como controle do processo de lodos ativados. Entretanto, esta atividade encontra-se pouco desenvolvida como instrumento nesses processos, pois na prática se encontram problemas de amostragem, contagem e de aproveitamento dos dados obtidos, devido à interação complexa (CETESB, 2000).
Diversos efluentes industriais têm sido submetidos ao tratamento pelo processo de lodos ativados, no entanto, o impacto de diferentes substratos sobre a microbiota do lodo não tem sido muito reportada.
A indústria de papel e celulose descarrega no meio ambiente uma enorme variedade de substâncias químicas, tóxicas, além de apresentar uma cor intensa resultante da presença de lignina e de seus derivados, que causam danos aos ecossistemas aquáticos dificultando a passagem da luz e impedindo a realização da fotossíntese (FREIRE et al., 2000). Já a indústria têxtil é responsável pela geração de efluentes com elevados níveis de coloração, demanda bioquímica de oxigênio, sólidos em suspensão e baixas concentrações de oxigênio dissolvido (ASSALIN et al., 2004). Dentre outras espécies químicas presente no meio, especial atenção tem sido dada aos corantes reativos, principalmente em função da sua elevada toxicidade e resistência ao ataque microbiano (CETESB, 2001). O efluente da indústria de queijos constitui-se basicamente de soro, que representa 85-95 % do volume de leite e retêm cerca de 55% dos nutrientes do leite, sendo constituído de lactose, proteínas e lipídios, que são responsáveis pela altíssima carga orgânica deste efluente (ALMEIDA, 2004).
O objetivo deste trabalho é identificar as diferenças na microbiota de sistemas de lodos ativados submetidos ao processo de aclimatação natural aos efluentes têxteis, papeleiros e queijeiros durante 30 dias.
2. MATERIAIS E MÉTODOS
As amostras de lodos ativados foram coletadas na Estação de Tratamento de Esgoto Santa Rosa, SANASA - Campinas, SP. As amostras foram colocadas em frascos de polietileno, que foram preenchidos até a metade de seu volume de modo a manter oxigênio em sua parte superior, necessário à sobrevivência da microbiota durante o transporte. Tal biomassa foi submetida ao processo de aclimatação de reatores de escala laboratorial como ilustrado na Figura 1 pelo período de 30 dias.
Figura 1: Esquema do reator de lodo ativado utilizado
O lodo foi monitorado através da determinação de pH, SS (sólidos suspensos) e contagem bacteriana (UFC).
Para a análise de sólidos suspensos uma alíquota de 10 mL de lodo proveniente dos bioreatores foi filtrada utilizando-se filtros GF-C Wattman, que retêm partículas maiores que 1,0 (m, previamente seco e pesado. Após secagem em estufa por 2 horas, o papel de filtro foi retirado e deixado em dessecador até atingir a temperatura ambiente, quando então é novamente pesado. Pela diferença na massa do filtro foi calculado o teor de sólidos suspensos. O valor ótimo para SS descrito na literatura situa-se na faixa de 1500-3000 mg·L-1 (Diez e Col, 2002).
A análise das bactérias foi feita pelo método de esgotamento em placa para a obtenção de colônias isoladas em um meio nutriente não seletivo (ágar nutriente). O período de incubação foi de 24 horas a 37°C. Observou-se por coloração de gram a morfologia celular e a composição da parede celular bacteriana do lodo antes da aclimatação e aclimatado.
Foram determinadas contagens das colônias bacterianas, tendo sido as amostras diluídas sucessivamente em água estéril e as diluições plaqueadas em meio ágar nutriente por 24 horas a 37°C. As colônias formadas foram contadas e expressas em 10x UFC mL-1 (APHA 1995)
A análise qualitativa de protozoários e de micrometazoários foi feita por microscopia ótica com Microscópio Olimpus Vanox modelo AH2 (cedido pela Divisão de Microbiologia do CPQBA) e estes organismos foram separados em: Filo Protozoa, sendo encontradas as classes sarcodina, ciliata, mastigophora e Micrometazoários como: rotífera, nemátoda, tardigrada e anélida (CETESB, 2000).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Foi feita uma caracterização inicial do lodo ativado recém coletado através dos parâmetros de pH, sólidos suspensos (SS) e contagem bacteriana (UFC·mL-1). Foram avaliados os protozoários presentes no início e ao final de um mês de aclimatação. Na Tabela 1 podem ser observados os resultados obtidos da contagem bacteriana, pH e SS para o lodo ativado recém coletado.
Tabela 1. Resultados obtidos antes da aclimatação do lodo ativado pelos efluentes.
ParâmetrosEfluente PapeleiroEfluente TêxtilEfluente QueijeiropH
8,306,507,09SS (mg L-1)315021002170Contagem Bacteriana
(UFC mL-1)2 x1072 x107ND.**ND. – não determinada
Há uma divergência nítida ao relacionarmos os valores de SS e isto pode ser explicado devido ao fato de que diferentes coletas de lodos foram feitas para a montagem do bioreator e aclimatação nos três diversos efluentes. Os valores de sólidos suspensos (SS) são também variáveis de uma coleta para outra, porém esses servem somente como partida para o objetivo do trabalho. A contagem das colônias bacterianas permaneceu idêntica para os efluentes da indústria papeleira e têxtil.
Na Tabela 2 são apresentados os resultados de contagem bacteriana, pH e SS obtidos após a aclimatação do lodo ativado aos efluentes estudados. Ocorreu um aumento do número de unidades formadoras de colônia, com exceção do efluente têxtil. Na aclimatação com o efluente papeleiro (pH corrigido para 7,50) o pH do lodo sofreu elevação em relação ao lodo coletado, mas em contato com o efluente apresentando pH corrigido para 7,50, ocorreu uma diminuição do valor inicial de 8,30 para 7,86. Observou-se com o crescimento bacteriano uma satisfatória adaptação da microbiota aos efluentes da indústria queijeira e papeleira, demonstrando assim, uma possível eficiência do processo.
Tabela 2. Resultados obtidos após a aclimatação do lodo ativado pelos efluentes.
ParâmetrosEfluente PapeleiroEfluente TêxtilEfluente QueijeiropH7,868,507,45SS (mg L-1)510010002780Contagem Bacteriana
(UFC mL-1)3 x 1081,4 x 1071,7 x 108
Na aclimatação do efluente têxtil foi observada uma diminuição do crescimento bacteriano com redução considerável do valor de colônias, assim como diminuição do valor de sólidos suspensos. Mesmo sem retirada do lodo ao adicionarmos efluente, não foi possível a recuperação da população. O período de aclimatação proposto para o respectivo efluente parece não ter sido suficiente para uma aclimatação da microbiota.
Para todos os sistemas estudados foram somente observadas bactérias gram-negativas, que apresentaram morfologia de cocos, diplococos e bastonetes. Quanto às bactérias presentes nenhuma diferença foi observada para os parâmetros estudados durante o período de aclimatação, sendo necessária a identificação de gênero e espécie para que se possa melhor inferir sobre a população de bactérias predominantes nos sistemas estudados.
3.1 Avaliação de Protozoários e Micrometazoários na Aclimatação do Lodo ativado ao Efluente Papeleiro
Na Tabela 3, podem-se avaliar quais os organismos estavam presentes no início e final do período de aclimatação, assim como a estimativa qualitativa dos mesmos.
Tabela 3. Presença dos organismos ao início e fim da aclimatação do efluente papeleiro.
Protozoários e MicrometazoáriosInicialFinalClasse ciliataPouca quantidade livres e fixosMuitos
livres e fixosClasse sarcodinaNI*MuitosClasse mastigophoraMuitos e pequenosPoucosRotíferosPoucosMuitosNemátodasPoucosNI* Anélidas NI*NI* *N.I. = Não Identificado
Ao início da aclimatação foi possível observar nemátodas que são indicativos de pobre sedimentabilidade, porém ao final não mais são encontrados. A população de rotíferos aumentou bastante, também a de ciliados livres e fixos que são indicativos da eficiência do processo. Foram observados Aspidisca costata, Tracheophyllum sp. (Classe ciliata – livre), Vorticella sp., Opercularia sp. (Classe ciliata - fixo), tanto coloniais quanto isoladas, Tecamebas (Classe sarcodina), Rotaria citrinus e Philodinavus paradoxus (Rotíferos).
3.2 Avaliação de Protozoários e Micrometazoários na Aclimatação do Lodo ativado ao Efluente Têxtil.
Pelos dados da Tabela 4, podem-se verificar as espécies presentes no início e final do período de aclimatação.
Tabela 4. Presença dos organismos ao início e fim do tratamento do efluente têxtil.
Protozoários e MicrometazoáriosInicialFinalClasse ciliataPoucos
livres e fixosMuitos
livres e fixosClasse sarcodinaNI *MuitosClasse mastigophoraPoucosNI *RotíferasMuitosMuitosNemátodasNI *NI *Anelidas NI *NI * *N.I. = Não Identificado
Houve predomínio de ciliados livres como Paramecium sp. Os ciliados fixos encontrados predominantemente foram dos gêneros Vorticella e colônias de Opercularia. Ao final da aclimatação foi observada grande quantidade de Amoeba (classe sarcodina), assim como Tecamebas, sendo indício de boa eficiência do processo. A população de rotíferos parece não ter se alterado e foram observadas as espécies Rotaria citrinus e Philodinavus paradoxus (CETESB, 2000) .
3.3 Avaliação da Microbiota na Aclimatação do Lodo ativado ao Efluente Queijeiro
Na Tabela 6, podem-se observar os protozoários e micrometazoários presentes no início e no final da aclimatação, assim como uma estimativa qualitativa destes organismos.
Ao início da aclimatação foi possível observar predominância de rotíferos e esta predominância se estendeu até o final do período de um mês. Observamos as espécies Rotaria citrinus, Philodinavus paradoxus comum aos outros dois efluentes e a espécie Epiphanes brachionus que se apresentou exclusivamente na aclimatação deste efluente.
Os ciliados fixos foram encontrados em baixa concentração e foram observadas Vorticella sp. e Opercularia sp.. Ao início da aclimatação foi observada pouca quantidade de Tecamebas (classe sarcodina), e o único ciliado livre observado foi o Blepharisma sp., apresentando coloração rosada.
A presença de tecamebas e de ciliados fixos conferem à aclimatação uma eficiência no tratamento por lodos ativados (CORDI et al., 2008).
Tabela 6. Presença da microbiota ao início e fim da aclimatação do efluente queijeiro.
Protozoários e MicrometazoáriosInicialFinalClasse ciliataPoucos fixos e livresMuitos livresClasse sarcodinaPoucosNI *Classe mastigophoraPoucosPoucosRotíferosMuitosMuitosNemátodasNI *NI *Anelidas NI *NI * *N.I. = Não Identificado
REFERÊNCIAS
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AGRADECIMENTOS
À FAPESP pelo apoio financeiro e ao Dr. Alexandre Nunes Ponezi e à Dra. Marta Teixeira, da Divisão de Microbiologia do Centro Pluridisciplinar de Pesquisas Químicas, Biológicas e Agrícolas (CPQBA)/UNICAMP.
Mestra pela Faculdade de Engenharia Química da Universidade Estadual de Campinas. Doutoranda do Programa de Genética e Biologia Molecular do Instituto de Biologia da Universidade Estadual de Campinas. CP: 6109, CEP 13084-970, Campinas-SP. e-mail: cordi@unicamp.br
Doutora em Ciências pelo Instituto de Química da Universidade Estadual de Campinas. Técnica de Nível Superior da Embrapa Meio Ambiente, Rodovia SP 340 km 127,5 - Tanquinho Velho, CP. 69 CEP 13820-000 Jaguariúna- SP. e-mail: massalin@cnpma.embrapa.br
Doutora em Ciências pelo Instituto de Química da Universidade Estadual de Campinas. Docente da Faculdade de Tecnologia SENAI CETIND, Área de Meio Ambiente, Av. Luis Tarquinio Pontes, 938, Aracuí. CEP 42700000, Lauro de Freitas- BA. e-mail:ednasa@cetind.fieb.org.br
Professora da Universidade Metodista de Piracicaba. Laboratório de Energia e Meio Ambiente, Universidade Metodista de Piracicaba, Rodovia SP 306 - km 24, 13450-000, Santa Barbara d’Oeste - SP. e-mail: sgmoraes@unimep.br
Professor da Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química, Laboratório de Química Biológica, Laboratório de Química Biológica - IQ. Universidade Estadual de Campinas, CP. 6154, CEP 13084-970, Campinas-SP. e-mail: duran@iqm.unicamp.br
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